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色谱法又称层析法.是一种以分配平衡为机理的分配方法
色谱包含两个相，一个是固定相,一个是流动相.当两相相对运动时反复多次利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异，之后达到彼此分离的目的
色谱法按固定相可分为柱层层析硅胶粉40/60/100/200/目500g/瓶
1.柱色谱
2 .平板色谱
3 .棒色谱
实验室中常用的是柱层析(常说的过柱子)和薄层层析以及它们之间的配合应用柱色谱固定相通常是硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性
1、吸附色谱的原理一定条件下，硅胶与被分离物质之间产生作用这种作用主要是物理和化学作用两种。物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力;化学作用主要是硅胶表面的 硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。
2、操作
硅胶准备一般选用200-00目和300-400目.实验仪器准备一支玻璃色谱柱，一个铁架台，烧杯锥形瓶，径口直径较大的玻璃漏斗，一支玻璃棒等。柱层层析硅胶粉100/200/300/400/800/1200目精致试剂柱层
3、装柱吸附剂的加入
干法:用带有砂芯板的色谱柱(或在普通色谱柱下端加少许棉花或玻璃棉)，打开下口，然后将吸附剂经漏斗缓缓 加入柱中，同时轻轻敲动色谱柱，使吸附剂松紧一致。湿法:将吸附剂加入合适量的色谱初使用的洗脱剂，调成糊状，打开带有砂芯板的色谱柱(或预先在下端加少许棉花或玻璃棉的普通色谱柱)的下口然后徐徐将制好的糊浆灌入柱子。注意整个操作过程要慢慢进行，不要将气泡压入吸附剂中，而且要始终保持吸附剂上端有溶剂，切勿流干。之后让吸附剂自然下沉，当洗脱剂刚好覆盖吸附剂平面时，关紧下口活塞。
4、加样
干法:当被分离物质难溶于初使用洗脱剂时，可选用一种对其溶解度大而且沸点低的溶剂，将样品溶于尽可能少的该溶剂中，将溶液加入适量吸附剂中或将吸附剂加入溶液中，拌匀挥干溶剂，研磨使之成为松散均匀的粉末，轻轻撒在色谱柱吸附剂上面，再撒一层保护用细砂或所用吸附剂。注意干法装柱时，色谱柱的活塞应处于开启的状态。
湿法:把被分离的样品溶于少量色谱初使用的洗脱剂中，小心加在吸附剂上层，注意上样时，必须使柱内洗脱剂刚好覆盖吸附剂平面，并保持吸附剂表面为一水平面，打开下口，待溶液正好流至与吸附剂上表面一致时，加少量洗脱剂(少量多次淋洗柱壁，关闭柱下端活塞。
5、洗脱
通常按流动相洗脱能力大小，递增变换流动相的品种和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分***减少 或不再含有时，再改变流动相的品种和比例。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。
6、检测
初步检测，当冲洗溶剂流出一定量后，可对流出液进行初步检测，并且将锥形瓶更换成小试管进行收集。通常是取一小薄层板，用铅笔和直尺将硅胶板分划成多个小方块，并按一定的次序编号。取一根内径为0.3mm左右的玻璃毛细管蘸取少量流出液点于薄层板的一个小格内，待半点干后，然后用物理的或化学的方法检测。
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