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实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)是在聚合酶链反应(PCR)中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号累积实时检测整个PCR反应进程的仪器。广泛应用在分子诊断,分子生物学研究,动植物检疫以及食品安全检测等领域。
其原理是激光或LED等光源发出的光经过特 殊设计的激发干涉滤光片后,经过反应杯并激发其中的荧光基团,荧光基团发出的荧光通过经匹配设计的发射干涉滤光片后被光电探测器接收。
每个反应循环收集一次数据,通过实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据建立的标准曲线利用CT值确定DNA起始拷贝数,做到了真正意义上的DNA定量。PCR巧妙地把核算扩增与杂交,光谱分析和实时检测技术结合在一起, 利用荧光信号来检测PCR产物。
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