齐一生物-大鼠内源性糖皮质激素(GC)检测试剂盒相关检测说明书
本试剂盒仅供研究使用
公司相关说明:齐一生物科技(上海)有限公司,公司主要经营ELISA酶联***检测试剂盒、进口原装ELISA试剂盒、分子生物学检测试剂盒、***学检测试剂盒、各品牌***抗体抗原、细胞菌株、生物培养基、生化试剂、实验耗材等多门类上万余种科研试剂产品!产品涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学的各个领域!
大鼠内源性糖皮质激素(GC) ELISA Kit样本采集及处理方式供您参考,如有问题请咨询:齐一生物全国热线:400-991-0197电话:021-60348467 手机:17302104490 QQ:573652375;或咨询在线客服QQ,或者以邮件形式发到我司邮箱 qiyibio@163.com
使用目的 :本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中大鼠内源性糖皮质激素(GC)表达。
实验原理 :本试剂盒采用双抗体夹心酶联***法(ELISA)测定标本中大鼠内源性糖皮质激素(GC) 。用纯化的大鼠内源性糖皮质激素(GC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中大鼠内源性糖皮质激素(GC)抗原相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的大鼠内源性糖皮质激素(GC)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过***洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中大鼠内源性糖皮质激素(GC)的存在与否。
大鼠大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒的优点:
1、抗体高效、灵敏度高、特异性强;
2、重复性和可靠性稳定;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
现货供应(GC)大鼠内源性糖皮质激素检测试剂盒
1.标本处理:血清、血浆标本可直接检测
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测,可将标本在-20℃保存一个月,但应避免反复冻融。
现货供应(GC)大鼠内源性糖皮质激素检测试剂盒需要自备的试剂和器材:
1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头
4.蒸馏水,
5.一次性试管
6.吸水纸
ELISA试剂盒操作步骤 :
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照(标准品)50μl。然后在待测
样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,
尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:重复操作同 3。
8. 洗涤:重复操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A 50μl,再加入显色剂 B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品 OD 值< 临界值(CUT OFF)者为大鼠大鼠内源性糖皮质激素(GC)阴性
阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为大鼠大鼠内源性糖皮质激素(GC)阳性
注意事项:
1.底物请避光保存。
2.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
3.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用 。
4.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
5.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。
ELISA试剂盒保存条件及有效期:
1.试剂盒保存 : 2-8℃。
2.试剂盒有效期: 6 个月
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