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表３ 三 次 重 复 细 菌 基 数 表
生长
指标
基 数(个/ml) 生长
指标
基 数(个/ml) 生长
指标
基 数 (个/ml) 生长
指标
基数 (个/ml) 生长
指标
基数 (个/ml)
000 0.0 110 0.7 211 2.0 300 2.5 320 9.5
001 0.3 111 1.1 212 3.0 301 4.0 321 15.0
010 0.3 120 1.1 220 2.0 302 6.5 322 20.0
011 0.6 121 1.5 221 3.0 310 4.5 323 30.0
020 0.6 130 1.6 222 3.5 311 7.5 330 25.0
100 0.4 200 0.9 223 4.0 312 11.5 331 45.0
101 0.7 201 1.4 230 3.0 313 16.0 332 110.0
102 1.1 202 2.0 231 3.5 333 140.0
210 1.5 232 4.0
表４ 细 菌 总 数 结 果 报 告 例 表
例 长 菌 观 察 生 长
指 标 数
细 菌
总数 （个/ml）
1号瓶 2号瓶 3号瓶 4号瓶 5号瓶 …
0 1 2 3 4 …
1 +- -- -- -- -- 100 100 0.6×100
2 ++ ++ -- -- -- … 200 101 2.5×101
3 +++ +++ +++ ++- --- … 320 102 9.5×102
4 +++ +++ +++ +++ +++ … 300 104 ≥2.5×104
4
简易测试瓶使用说明
使用我公司出品的简易测试瓶系列产品，请在使用前仔细阅读该使用说明手册。
一、产品品种：
总数测试瓶（BT）
菌群测试瓶（FCB）
腐生菌测试瓶（TGB）
铁测试瓶（FEB）
盐还原菌测试瓶（SRB）
、方法原理：
采用迹稀释法，即用无菌器将待测定的水样逐注入到测试瓶中，进行接种稀释后，置于培养箱培养，根据测试瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中总数。
三、操作步骤：
① 将同一品种测试瓶排成一组，依次编上序号（按照估计的定测试瓶个数，建议参考数值为：X×100的用３个测试瓶、X×101的用４个测试瓶、X×102的用５个测试瓶、X×103的用６个测试瓶）。
做个平行样重复试验时应排为组；做三个平行样重复试验时应排为三组。
② 用无菌器取1ml代表性水样（采样方法依据GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T12999-1991、GB/T14581-1993的规定进行）注入1号瓶内稀释，充分振摇，待用（平行样亦按此操作，下同）；
1
③ 用另一支无菌器从1号瓶内抽取0.5 ml经充分振摇后的水样注入2号瓶内稀释，充分振摇，待用；
④ 再用一支无菌器从2号瓶中内抽取0.5ml经充分振摇后的水样注入3号瓶内稀释，充分振摇，待用；
⑤ 依次类推稀释直到后一瓶为止，待用。
⑥ 将上述稀释过的测试瓶放入恒温培养箱中培养，按表１进行生长的鉴别。
表１ 细 菌 生 长 的 鉴 别 方 法
瓶品种 规格型号 培养温度 培养 时间 阳性反应征
总数测试瓶 KBC—BT 37±2℃ 24±2h 瓶中液体由红变黄、或液体混浊、或液体表面出现菌膜、或液体底部出现沉淀。
菌群测试瓶 总菌群 KBC—TCB 37±2℃
24±2h
瓶中液体由紫红变黄
粪菌群 KBC—TCB 44±2℃
腐生菌测试瓶 KBC—TGB 现场采样温度±3℃ 24±2h 瓶中液体由红变黄
铁测试瓶 KBC—FEB 24 瓶中液体棕色褪去，生成棕色或黑色沉淀
盐还原菌测试瓶 KBC—SRB 7H 瓶中无色液体变黑或生成黑色沉淀
2
四、计：
１．在一定温度下培养一定时间后，按瓶号列出稀释梯度，并根据瓶阳性反应的个数，定生长指标和数（参见附录及例）．
２．根据生长指标查表２或表３，定基数并乘以数，即为总数。
总数＝基数×数
组平行样重复试验查表２
三组平行样重复试验查表３
3、总数例见表４
五、注意事项
1、测试瓶中若有白色沉淀为过营养成份，属正常现象，影响测试。
2、常温条件下，测试瓶储存期为一年。
3、测试瓶经稀释后，一定要用力振摇1~2分钟，以测试的准性。
表２ 次 重 复 细 菌 基 数 表
生 长
指 标 基数 (个/ml) 生 长
指 标 基数 (个/ml) 生 长
指 标 基数 (个/ml) 生 长
指 标 基数 (个/ml) 生 长
指 标 基数 (个/ml)
000 0.0 020 0.9 111 2.0 201 5.0 220 25.0
001 0.5 100 0.6 120 2.0 210 6.0 221 70.0
010 0.5 101 1.2 121 3.0 211 13.0 222 110.0
011 0.9 110 1.3 200 2.5 212 20.0
3
例2、
①√ ②√ ③√ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂√ ⑤＂
+ + + - -
+ + + - -
+ + - + -
3 2 1
即
则此生长指标为321，数为1。查三次重复计数表。321对应的为15个/ml。此系列为：15×101=150个/ml。
例3、
① ②√ ③ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂
- + - - -
+ + + - -
- - - - -
1 2 1
即
则此生长指标为121，数<0。查三次重复计数表。121对应的为1.5个/ml。此系列为：≤1.5×100既≤1.5个/ml。
例4、 ①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂ ⑤＂
8
附录
一、 生长指标的定原则．
１． 部呈阳性反应的后一列平行样应为生长指标的位数．
２． 同一平行样，有Ｘ个阳性反应瓶，生长指标即为Ｘ．
、数的定原则
１．部呈阳性反应的后一列平行样的瓶号数减去１，即为数ｎ，以１０ｎ表．
２．１号瓶的２或３个平行样未部发生阳性反应时，数为０，即为１００
例１
① ② ③ ④ ⑤
+ - - - -
+ + - - -
+ + + - -
生长指标： ３ ２ １
数： １００ （①－１＝０）
例２
① ② ③ ④ ⑤
+ + + - -
+ + + - -
+ + + + +
生长指标： ３ １ １
数： １０２ （③－１＝２）
5
例３
① ② ③ ④ ⑤
+ + - + -
+ + + - -
生长指标： ２ １ １
数： １０１ （②－１＝１）
例４
① ② ③ ④ ⑤
- + - - -
+ - + - -
生长指标：１ １ １
数： １００
6
测试瓶测试方法及例
例、做三个平行样重复试验，每个样稀释5个梯度：
① ② ③ ④ ⑤
①／ ②／ ③／ ④／ ⑤／
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂
即分别在① ①／①＂号瓶中注入0.5ml水样，摇匀后取出0.5ml再分别注入② ②／②＂号瓶中；摇匀后取出0.5ml再分别注入到③ ③／③＂号瓶中，依次类推，直至⑤ ⑤／⑤＂号瓶。
在恒温下放置一定时间后（菌群37℃，）观察测试瓶阳性（变色）反应个数。
例1、（打√者为阳性反应---以+表）
①√ ② ③ ④ ⑤
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂ ⑤＂
+ - - - -
+ + + - -
+ + - - -
3 2 1
即
则此生长指标为321，数为0。查三次重复计数表。321对应的为15个/ml。此系列为：15×100=15个/ml。
7
阳性反应，应注明“≥”，（如例5）。此情况下说明，应增测试瓶的个数，以求得较准的。
⑤ 测试瓶注入水样（稀释）后应用力振摇，以的准性；逐稀释水样时，应换无菌器，以的准性。
10
+ + + + +
+ + + - +
+ + + - -
3 1 2
即
此生长指标为312，数为2。查三次重复计数表。312对应的为11.5个/ml。此系列为：11.5×102个/ml。
例5、①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂√ ⑤＂√
+ + + + +
+ + + + +
+ + + + +
3 0 0
即
则此生长指标为300，数为4。查三次重复计数表。300对应的为2.5个/ml。则此系列为≥2.5×104个/ml。
注意事项：
① 做几个平行样对应查几次重复计数表（即生化检测方法中的MN表）。
② 计算公式为：瓶号数-1=数n，即在后应 ×10n。
如 1号瓶数为0，即在后×100；
2号瓶数为1，即在后×101；
3号瓶数为2，即在后×102；
③ 部阳性反应的后一列应为生长指标的位数。
如例1中的生长指标位数3对应① ①／①＂号瓶
例2中的生长指标位数3对应② ②／②＂号瓶
9
例4中的生长指标位数3对应③ ③／③＂号瓶
依次类推。
④ 如果列（① ①／①＂号瓶）未部发生阳性反应，应注明“≤”，如例3；如果至后一列（⑤ ⑤／⑤＂号瓶）部发生阳性反应，应注明“≥”，（如例5）。此情况下说明，应增测试瓶的个数，以求得较准的。
⑤ 测试瓶注入水样（稀释）后应用力振摇，以的准性；逐稀释水样时，应换无菌器，以的准性。
10
+ + + + +
+ + + - +
+ + + - -
3 1 2
即
则此生长指标为312，数为2。查三次重复计数表。312对应的为11.5个/ml。此系列为：11.5×102个/ml。
例5、①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂√ ⑤＂√
+ + + + +
+ + + + +
+ + + + +
3 0 0
即
则此生长指标为300，数为4。查三次重复计数表。300对应的为2.5个/ml。则此系列为≥2.5×104个/ml。
注意事项：
① 做几个平行样对应查几次重复计数表（即生化检测方法中的MN表）。
② 计算公式为：瓶号数-1=数n，即在后应 ×10n。
如 1号瓶数为0，即在后×100；
2号瓶数为1，即在后×101；
3号瓶数为2，即在后×102；
③ 部阳性反应的后一列应为生长指标的位数。
如例1中的生长指标位数3对应① ①／①＂号瓶
例2中的生长指标位数3对应② ②／②＂号瓶
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反应，应注明“≥”，（如例5）。此情况下说明，应增测试瓶的个数，以求得较准的。
⑤ 测试瓶注入水样（稀释）后应用力振摇，以的准性；逐稀释水样时，应换无菌器，以的准性。
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