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Presens SFR 为什么在摇瓶中在线测量不同参数很重要

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Presens SFR 为什么在摇瓶中在线测量不同参数很重要

为什么在摇瓶中在线测量不同参数很重要

SFR 变量在线测量 O2、OUR、pH 和生物量

马施克

光学传感器即使在摇瓶规模下也能监测和控制重要的培养参数。在这篇简短的报告中,我们展示了酿酒酵母培养中使用SFR变量进行多参数监测的示例,以及不同的传感器如何在不同的培养阶段提供最确凿的信息。


图1:振荡培养箱内的SFR变量监测单元;四个SFR vario单元可与控制软件同时控制。

SFR vario

SFR vario是一种用于摇瓶的光学监测装置,可以同时测量多个参数。光学氧、pH 值和一氧化碳2传感器***集成在摇瓶中,然后可以通过透明烧瓶底部读取,同时通过背散射光测量测量生物质。两种测量方法都是完全非侵入性的,因此在振荡过程中不需要采样或任何其他干扰,同时数据可在线获得。此外,OUR 是使用 SFR vario 软件 PreSens Flask Studio 根据氧气测量值自动计算的。

多参数方法

在下文中,我们展示了酿酒酵母培养物中多传感器监测的示例,以说明不要仅依赖一个参数的测量的重要性。在不同的培养阶段,不同的传感器提供结果,从而实现可靠的整体图像。

酿酒酵母培养物中的多传感器监测

图 2 显示在线 O2, 我们的, 酸碱度, 一氧化碳2以及YPD培养基中酿酒酵母菌株的生物量测量。培养在500mL摇瓶中,填充体积为100 mL,在30°C和180rpm(50mm振荡直径)下进行。


图2:用SFR变量监测的500 mL摇瓶中的酿酒酵母培养物。O2、酸碱度和一氧化碳2使用集成在摇瓶中的光学传感器***进行监测,并使用SFR vario通过烧瓶底部读取,通过背散射光测量确定生物量。OUR 是使用系统控制软件 PreSens Flask Studio 根据氧气测量值自动计算的。

在培养的前 6 小时内,氧传感器信号显示连续、增加的耗氧量——这是一个明确的信号,表明培养物呈指数增长。即使是OUR在第 6 小时短暂下降也很容易识别。它是由当初级碳源(葡萄糖)变得受***从乙醇生产到乙醇消耗的代谢转换引起的(见CO2传感器)。后来氧气变得有限,O2水平保持为零,即没有关于系统动态的更多信息。

由于最初的低细胞密度,反向散射光测量无法在前 2 小时内给出结论性信息。但是,当氧传感器由于氧气供应受限而保持在0%时,它继续提供有关生物质形成的信息。

(可选)一氧化碳2传感器显示乙醇生产过程中二氧化碳水平的增加。代谢转换后一氧化碳2然后产量下降,这也反映在pH值下降较慢,因为CO2存在于培养液中。7小时后,当耗氧率达到值时,O2信号没有提供进一步的有用信息。在这个培养阶段,一氧化碳的信号2pH传感器提供更确凿的信息,9小时后pH值上升表明持续增长。在此期间,生物质信号现在清楚地显示了不断增加的增长曲线。

结论

SFR vario 可监控多个独立测量的参数并提供全貌。这些信号可以相互验证,以获得更高的生物过程安全性以及更可靠和可重复的生产。它为整个文化时期提供了不间断的结论性信息。这使其成为摇瓶规模工艺开发的理想工具。

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