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沙丁胺醇酶联试剂盒 [食品安全试剂盒 激动剂检测试剂盒]
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氯霉素（CAP）酶联检测试剂盒【食品安全试剂盒>残留检测试剂盒】
1 概述
氯霉素是一种常用的广谱抗菌素，通过抑制蛋白质合成而发挥抑菌作用，对大多数革兰氏阴性和阳性有效，而对革兰氏阴性菌作用较强，特别是对伤寒、副伤寒杆菌作用强。但使用氯霉素存在严重的毒副作用，主要是抑制骨髓造血功能，引起粒细胞及血小板减少症以及再生障碍性贫血。再生障碍性贫血虽少见，但难逆转，常可致死。
本试剂盒采用竞争酶联法，测定肉类、水产品、牛奶、蛋类、蜂蜜、蜂皇浆、饲料等食品中的氯霉素类残留。
2 原理
样品中的游离氯霉素与酶标记的氯霉素竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体，通过洗涤洗掉未结合的酶标记氯霉素，再通过酶的专一性显色剂显色根据显色的深浅来判断样品中氯霉素含量。根据竞争性原理，如果样品中的游离氯霉素量少，则酶标记的氯霉素结合的多，显色深，反之，则显色浅。检测时设置标准曲线，通过标准曲线测定样品中氯霉素的含量。
3 试剂盒组成
3.1氯霉素酶标板：96孔
3.2 氯霉素标准品：6瓶（1ml/瓶），分别是：
标准品 | ① | ② | ③ | ④ | ⑤ | ⑥ |
浓度ng/ml | 0 | 0.025 | 0.1 | 0.2 | 0.4 | 1.6 |
3.3 氯霉素酶结合物：1瓶（6ml）
3.4 浓缩样品复溶液：1瓶（10×, 25ml）
3.5 浓缩洗涤液：1瓶（10×，50ml）
3.6 底物液A：1瓶（6ml）
3.7 底物液B：1瓶（6ml）
3.8 终止液：1瓶（6ml）
3.9 说明书：1份
3.10 质检报告：1份
4 需要而未提供的材料
4.1 酶标仪（检测波长450nm，参考波长630nm）
4.2 微量移液器
4.3 前处理所需试剂及相关仪器
5 贮存
5.1 试剂盒贮存于2-8℃，切勿冷冻
5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
5.3 该产品有效期为12个月
6 注意事项
6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（20-25℃）。
6.3 不要使用过期试剂盒；不同批号试剂盒中的试剂不得混
用；不同标准品、样品所用吸头不能混用。
6.4 避免所有试剂接触皮肤；混合试剂时应避免起泡。
7 试剂配制
7.1 洗涤工作液：
用去离子水将浓缩洗涤液按1：9体积进行稀释
例如：10ml洗涤工作液=1ml浓缩洗涤液+9ml去离子水
7.2 样品复溶液：
用去离子水将浓缩样品复溶液按1：9体积进行稀释
例如：10ml样品复溶液=1ml浓缩样品复溶液+9ml去离子水
8 样品处理程序
8.1牛奶、蜂蜜、蜂皇浆、饲料
取2g样本于玻璃管中，加入3ml去离子水（蜂皇浆加0.5M氢氧化钠），摇匀，再加入8ml乙酸乙酯充分振摇混合10min， 4000g离心10min。取2ml上层液移入另一玻璃管，并用50℃氮气流吹干。于试管残留物中加入0.5ml样品复溶液（见配液7.2）充分摇匀（饲料需再加入0.5ml正己烷震荡混匀后取下层），取50ul用于检测。(稀释系数1)
8.2 肉类、水产（虾、鱼）、蛋类
取2g已去除脂肪的肉类、水产（虾、鱼）、蛋类并匀浆化的样品于玻璃管中，加入8ml乙酸乙酯充分振摇混合10min， 4000g离心10min。取2ml上层液移入另一玻璃管，并用50℃氮气流吹干。于试管残留物中加入0.5ml样品复溶液（见配液7.2），并加入0.5ml正己烷，充分摇匀，4000g离心10min。离心后，若下层液出现乳化现象，应将试管放入80℃水浴中5min，再进行离心。完全除去上层的正己烷，从试管底部吸取50ul下层液用于检测。（稀释系数1）
8.3 血清（鸡血清、牛血清等）
方法一：用样本复溶液5倍稀释。例如：200ul血清+800ul样本复溶液（稀释倍数5）
方法二：准确移取1ml血清，加入4ml乙酸乙酯，振荡混匀，静置2min，取2ml上层液移入另一玻璃管，并用50℃氮气流吹干。于试管残留物中加入0.5ml样品复溶液（见配液7.2），并加入0.5ml正己烷，充分混匀。吸取液体到1.5ml离心管中，去掉上层有机层，取下层澄清液体50ul用于检测。（稀释倍数1）
9 酶免分析步骤
9.1实验准备
9.1.1预行编号，标记标准品和样品的位置，进行双孔检测（每次实验都须做标准曲线）
9.1.2使用前将所有试剂回升至室温,取所需数量的微孔条，将多余板条用试剂盒提供的自封袋重新密封同时排除里面空气，并立即放回2-8℃干燥保存
9.2分析步骤
9.2.1在标准品孔中加入50μl各标准品溶液，在各样品孔中加入50μl样品溶液；
9.2.2在所有孔中加入50μl的氯霉素酶标记物溶液，轻微晃动反应板使之混匀，室温下（20-25℃）温浴30min；
9.2.3甩干孔中液体，用洗涤工作液（250ul/孔）洗涤微孔板4-5次，后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体；
9.2.4洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl底物液A，再加 50μl底物液B，轻微晃动使之混匀；
9.2.5室温下（20-25℃）温浴15min，每孔中加入50μl终止液，混匀，在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。
10 结果计算
使用快灵Log/Logit计算程序对检测结果进行计算，将检测OD均值和标准品浓度输入，即可自动获得检测结果，再乘以稀释倍数1，即为样品氯霉素浓度。
11 特异性
氯霉素…… 氯霉素碱……0.5％ 甲基氯霉素……<0.1％
12 试剂盒其他参数
本试剂盒检测下限为0.025ng/ml
B0吸光度佳值应大于0.8
牛奶、蜂蜜、蜂皇浆、饲料回收率85±15%
肉类、水产（虾、鱼）、蛋类回收率85±15%
血清回收率100±10%
试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。
13 分析限制
本试剂盒检测为阳性的样品，建议用其他方法如HPLC加以确认。
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